maspin/pEFIRES-N表达载体的构建及应用

• 作者: 姚榛祥 阎雄
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: maspin pEFIRES-N表达载体 构建 应用
• 年，卷（期）: 2005,（22）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 2205-2208
• 页数: 4页
• 分类号: R394-22|R73-354|R735.7
• 字数: 3303字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.22.003

摘要

目的构建maspin/pEFIRES-N表达载体,为深入研究maspin基因抑制肝癌生长、转移、浸润作用和机制奠定基础.方法 PCR扩增maspin基因全长,将表达载体pEFIRES-N用EcoRⅠ+XbaⅠ进行双酶切后,T4DNA连接酶连接成重组质粒,稳定转染到肝癌高转移细胞株mHCC-97中进行表达,检测稳定转染前后maspin表达的变化.结果重组质粒在大肠杆菌株JM109内扩增.提纯、纯化后用EcoRⅠ、XbaⅠ酶切鉴定及测序鉴定证明maspin基因已完整、正确的插入到pEFIRES-N表达载体,并在肝癌MHCC-97细胞中上调了maspin基因mRNA和蛋白水平表达,抑制了肝癌MHCC-97细胞增殖及浸润.结论成功构建了maspin/pEFIRES-N表达载体,能在真核细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚榛祥	重庆医科大学附属第一医院普通外科	181	1171	17.0	27.0
2	阎雄	重庆医科大学附属第一医院普通外科	30	98	6.0	8.0