七筋菇植物ISSR-PCR反应体系研究

• 作者: 廖海民 王祎玲 赵桂仿
• 来源期刊: 山地农业生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 七筋菇 简单重复间序列 正交设计 条件优化 影响因素
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 34-38
• 页数: 5页
• 分类号: Q949.718.230.3
• 字数: 2479字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0457.2006.01.008

摘要

为建立适宜于七筋菇Clintonia udensis Trautv.et Mey.ISSR-PCR分析的扩增体系,确定引物适宜的退火温度,利用正交试验设计,从Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶单位、引物浓度4种因素4个水平,对七筋菇ISSR-PCR反应体系进行优化.结果表明,根据Tm-5℃±5℃设定引物的退火温度梯度,确定出不同引物的最适退火温度.对引物873来说,其最适退火温度为53℃.按照正交试验设计,测试不同引物各因子之间在不同水平的组合情况,确定不同引物的最佳组合体系.引物897在第10组合反应最佳即3.0 mmol · L-1Mg2+;0.2mmol · L-1dNTP;0.1μL Taq DNA聚合酶; 0.2μmol · L-1引物浓度.确定10μL的反应体系中,Mg2+为2.5～3.0mmol · L-1,dNTP为0.15～0.20mmol · L-1,引物浓度为0.20～0.25μmol · L-1,Taq DNA聚合酶为0.1μL,模板DNA用量为50ng.适宜的退火温度为48～62℃.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵桂仿	西北大学生命科学学院	88	2332	25.0	46.0
2	王祎玲	西北大学生命科学学院	8	125	6.0	8.0
6	廖海民	西北大学生命科学学院	51	341	11.0	17.0