血管基膜衍生多功能肽的表达及其生物活性的鉴定

• 作者: 张曼 彭淑平 戴文建 曹建国
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管基膜衍生多功能肽 抗肿瘤 血管形成抑制剂 血管基底膜 内皮细胞血管化
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 423-428
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 5372字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.06.005

摘要

目的: 在毕赤酵母中表达血管基膜衍生多功能肽(vascular basement membrane-derived mulifunctional peptide,VBMDMP),并鉴定其生物学活性.方法: 利用PCR技术获得融合了谷胱甘肽转移酶(GST)的肿瘤抑素(tumstatin)活性成分的GST-VBMDMP基因,克隆到pPIC9K载体;然后原生质体转化法转化毕赤酵母细胞,行多克隆筛选和表型鉴定.获得His+Muts表型的转化子,在MGY培养液中30 ℃摇床培养,每24 h从培养液中转移1 ml培养液上清于-70 ℃保存,并保持培养瓶中培养液的量和培养液中甲醇0.5%的浓度不变,第9天行SDS-PAGE检测表达的蛋白并纯化,然后进行细胞和动物生物活性检测.结果: SDS-PAGE发现阳性重组子在MGY培养液中表达的蛋白量在1～7 d逐渐增加,到第8天后开始减少,用Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化获得GST-VBMDMP融合蛋白; GST-VBMDMP能抑制C57BL/6鼠动脉内皮细胞管状结构的形成;同时GST-VBMDMP( 2 、6 、10 mg/kg)对小鼠Lewis肺癌原发瘤(瘤重抑制率分别为96.6%、82.1%、61.2%)和自发性肺转移瘤(瘤结节抑制率分别为96.8 %、87.9%、75.3%)均具有明显的抑制作用(P＜0.01).结论:VBMDMP能够抑制鼠动脉内皮细胞管状结构的形成,并对小鼠Lewis肺癌原发瘤和肺转移具有明显的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭淑平	中南大学肿瘤研究所	11	60	4.0	7.0
2	曹建国	南华大学肿瘤研究所	90	851	17.0	23.0
3	戴文建		8	55	4.0	7.0
4	张曼		2	2	1.0	1.0