黄花蒿ISSR-PCR反应体系的优化

• 作者: 邓婧 陈新
• 来源期刊: 成都中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 黄花蒿 ISSR反应体系
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 中药研究
• 页码范围: 51-53
• 页数: 3页
• 分类号: R282.5|R932
• 字数: 2882字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0668.2006.03.017

摘要

目的:建立黄花蒿(Artemisia annua L.)的LSSR最佳反应体系及PCR扩增参数,为今后利用ISSR标记技术开展黄花蒿种间遗传多样性分析提供一个标准化程序.方法:以黄花蒿DNA为材料,分析了ISSR反应体系中的DNA、.Mg2+、dNTPs浓度,TaqDNA聚合酶用量以及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响.结果:建立了重复性好,分辨率高的ISSR反应体系,即在25μL反应体系中,模板DNA浓度为15～45ng,2.5μL的10倍Buffer(Mg2+free)缓冲液,MgCl2 2.0 mmol/L,dNTPs为0.15mmol/L,Taq酶1.0 U,引物1.0 μmol/L;扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30s,引物在筛选后的最佳退火温度退火45s,72℃延伸2 min,共计40个循环,循环结束后在72℃延伸5 min.结论:建立了适用于黄花蒿的ISSR反应体系,为今后利用ISSR标记技术开展黄花蒿种间遗传变异分析和构建遗传图谱奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈新	成都中医药大学药学院	41	425	12.0	19.0
2	邓婧	成都中医药大学药学院	19	104	6.0	9.0