酵母双杂交文库筛选及N型钙离子通道与BART相互作用的初步分析

• 作者: 于盼盼 朱慧琴 杭勤 林琳 陆佩华 黄立东
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 酵母双杂交技术 钙离子通道 共定位
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-25
• 页数: 5页
• 分类号: Q189
• 字数: 4197字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2006.01.005

摘要

目的应用酵母双杂交技术筛选N型钙离子通道相关蛋白,并对候选蛋白BART(binder of arl two)进行初步分析.方法用N型钙离子通道α1亚基C端630个氨基酸残基肽段(Calcium channel 630 amino acids,CaCh630)作为探针,运用酵母双杂交技术筛选出与之相互作用的基因.通过PCR扩增并克隆候选基因BART,然后分别构建带有红色荧光蛋白标签的表达载体pDsRed-BART和带绿色荧光蛋白标签的pEGFP-CaCh630,共转染海马神经元后,用激光共聚焦扫描显微镜观察这两个外源蛋白在细胞中的定位情况.结果应用酵母双杂交技术筛选出6个相关基因,体外共转染试验发现BART和CaCh630分子在海马神经元内有共定位现象,进一步证明其可能存在相互作用.结论BART可能在维持钙离子通道细胞骨架中定位起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林琳	上海第二医科大学神经生物学实验室	12	26	3.0	4.0
2	黄立东	上海第二医科大学神经生物学实验室	11	28	3.0	4.0
3	陆佩华	上海第二医科大学神经生物学实验室	43	308	9.0	15.0
4	朱慧琴	上海第二医科大学神经生物学实验室	1	3	1.0	1.0
5	于盼盼	上海第二医科大学神经生物学实验室	3	16	3.0	3.0
6	杭勤	上海第二医科大学神经生物学实验室	7	48	3.0	6.0