海洋双RNA病毒(MABV)vp2e和vp3基因在昆虫细胞中的高效表达

• 作者: 张传溪 徐海君 杨章女 林建国
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 海洋双RNA病毒 VP2e VP3 杆状病毒表达系统 表达纯化
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 612-617
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 4746字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2006.04.033

摘要

海洋双RNA病毒(Marine bimavirus,MABV)可引起多种海洋鱼贝的腹水病等病症.利用RT-PCR技术得到了MABV Y-6株系A片段的cDNA,进而克隆了病毒的外壳蛋白VP2e的抗原决定簇区642 bp片段(vp2e)和另一结构蛋白VP3编码区序列.通过转座作用构建了重组杆状病毒表达载体,在昆虫细胞中对VP2e和VP3进行了表达.SDS-PAGE检测和薄层扫描表明,VP2e和VP3与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)融合蛋白表达量分别占整个昆虫细胞蛋白的15.8%和8.2%.用HisTag单抗和MABV病毒多抗对表达的VP2e融合蛋白进行Western blot检测,结果表明表达产物具有很好的抗原性.同样,用His Tag单抗和VP3多抗对表达的VP3融合蛋白进行的Western blot检测,证明融合蛋白表达正确,并且表达产物可溶,易于纯化.实验结果为该病毒结构蛋白和MABV疫苗研究提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张传溪	浙江大学昆虫科学研究所	69	719	14.0	23.0
2	林建国	浙江大学昆虫科学研究所	5	79	4.0	5.0
3	徐海君	浙江大学昆虫科学研究所	9	28	3.0	5.0
4	杨章女	浙江大学昆虫科学研究所	4	8	2.0	2.0