实时荧光定量PCR检测鸟苷酰环化酶C基因表达方法的建立

• 作者: 张冬雷 毛振彪 王唯一 鞠少卿 黄介飞
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鸟苷酰环化酶C 外周血单个核细胞 实时荧光定量
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 176-178
• 页数: 3页
• 分类号: R730.54
• 字数: 2458字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-764X.2006.03.006

摘要

目的建立实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测鸟苷酰环化酶C(GC-C)基因表达的方法.方法在GC-C基因高保守区设计了特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中GC-C mRNA含量,并以GC-C mRNA和β2M mRNA含量的比值作为评价GC-C表达水平的指标.结果本法检测GC-C mRNA含量的线性范围为101pg/ml～109pg/ml,样本批内和批间CV值分别为6.87%～11.12%和8.86%～15.19%.30例健康献血员和11例大肠良性病变患者的外周血单个核细胞(PBMC)中均未检出GC-C mRNA表达,大肠癌患者PBMC的GC-C mRNA检出率为83.8%(31/37),表达水平为0.88±0.06.10例大肠癌组织和T84细胞株均检出GC-CmRNA,表达水平分别为每μg组织(0.86±0.07)和每个细胞0.0082.结论成功建立RFQ-PCR检测GC-C mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度、特异性和可重复性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张冬雷	南通大学附属医院检验医学中心	39	158	8.0	10.0
2	毛振彪	南通大学附属医院消化内科	52	186	8.0	10.0
3	鞠少卿	南通大学附属医院检验医学中心	157	477	10.0	13.0
4	黄介飞	南通大学附属医院消化内科	82	397	11.0	14.0
5	王唯一	南通大学附属医院消化内科	8	41	4.0	6.0