β-防御素2基因腺病毒表达载体的构建与真核表达

• 作者: 姚航平 方向明 石卓 舒强 赵正言 陈智
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 防御素类/遗传学 腺病毒,人/遗传学 免疫组织化学 基因表达 β-防御素 抗菌肽 腺病毒表达载体 基因重组 基因治疗
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 590-595
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3942字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2006.06.003

摘要

目的:探讨重组腺病毒载体在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽--β-防御素2的可行性.方法:采用RT-PCR方法扩增得到大鼠β-防御素2(rBD2)基因片段,定向插入到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,重组质粒pShuttle-CMV-rBD2转化E.coli BJ5183-AD-1后,与腺病毒基因组质粒pAdEasy-1发生同源重组,重组质粒pAdEasy-rBD2转染293细胞进行腺病毒表达载体的包装.将包装成功的腺病毒感染COS-7细胞,并建立SD大鼠腺病毒感染模型,进行β-防御素2多肽的体外和体内表达,采用Western blot与免疫组化方法检测其表达.结果:重组腺病毒表达载体构建成功,包含大鼠β-防御素2基因,滴度达到109PFU/ml,Western blot与免疫组化方法分别检测到β-防御素2在SD大鼠体外、体内的表达.结论:重组腺病毒载体能在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽--β-防御素2.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈智	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	162	1080	15.0	27.0
2	方向明	浙江大学医学院附属第一医院麻醉科	106	500	11.0	16.0
3	赵正言	浙江大学医学院附属儿童医院胸外科	139	1172	17.0	28.0
4	舒强	浙江大学医学院附属儿童医院胸外科	88	279	8.0	12.0
5	姚航平	浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所	94	547	12.0	17.0
6	石卓	浙江大学医学院附属儿童医院胸外科	23	67	5.0	6.0