牛SRY蛋白表达纯化与体外功能鉴定

• 作者: 刘小林 朱化彬 杜卫华 林秀坤 柳向军 裴杰 赵金红
• 来源期刊: 动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: SRY基因 表达纯化 奶牛 Mis启动子
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1082-1087
• 页数: 6页
• 分类号: Q95
• 字数: 5223字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5507.2006.06.015

摘要

利用PCR技术从北京黑白花奶牛(Bos taurus)的基因组DNA中克隆了SRY(Sex-determining region on the Y chromosome)基因编码区全长序列.序列分析表明牛SRY基因的HMG区(High mobility group)呈现高度的保守性,与人、小鼠、猪等的相似性达到70%.将SRY基因与pET-28a(+)载体相连,构建表达载体pET-28a/SRY;把该表达载体转入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导30℃诱导4 h,SRY蛋白可高效表达,表达产物占总蛋白量的26%.对表达产物进行了Western-blotting检测,并采用亲和层析技术获得了高纯度的牛SRY蛋白.通过PCR技术分别获得牛、人、鼠的苗勒氏管抑制物(Mullerian Inhibiting substances,MIS)启动子,凝胶阻滞试验证明,牛SRY蛋白可与人及牛的MIS启动子结合,但与鼠的Mis启动子不发生相互作用[动物学报52(6):1082-1087,2006].

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘小林	西北农林科技大学动物科技学院	120	1293	18.0	31.0
2	朱化彬	中国农业科学院畜牧研究所	91	407	11.0	13.0
3	杜卫华	中国农业科学院畜牧研究所	77	377	11.0	14.0
4	赵金红	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	4	35	3.0	4.0
5	林秀坤	中国农业科学院畜牧研究所	10	61	4.0	7.0
6	柳向军	西北农林科技大学动物科技学院	4	64	3.0	4.0
7	裴杰	西北农林科技大学动物科技学院	4	21	3.0	4.0