人白细胞介素-10在大肠杆菌中的高效可溶性表达及一步纯化

• 作者: 何韶衡 李明才
• 来源期刊: 汕头大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素-10 大肠杆菌 可溶性蛋白 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 132-135
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2858字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4716.2006.03.002

摘要

目的:在大肠杆菌(E.coli)中表达和纯化人白细胞介素-10(IL-10).方法:用PCR技术从质粒pH15C中扩增编码人IL-10成熟蛋白的cDNA序列,将其克隆到pET-44载体中,构建表达质粒pET-44-IL-10.用菌落PCR和限制性酶切鉴定重组质粒并进行序列分析.重组质粒转化E.coli RosettaBlue(DE3)表达含6×His的重组人IL-10蛋白.重组蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化.结果:RosettaBlue(DE3)经1 mmol/L IPTG诱导、25℃培养,表达的IL-10主要以可溶性形式存在,表达效率为26%.超声破菌后的可溶性上清经一步Ni-NTA亲和层析进行纯化,所得蛋白纯度大于95%.结论:成功地得到了重组人IL-10纯品.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何韶衡	汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所	126	1181	16.0	27.0
2	李明才	汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所	29	234	8.0	14.0