沙眼衣原体热休克蛋白10基因真核表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达

• 作者: 李红发 罗惠莉
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 沙眼衣原体 热休克蛋白10基因 真核表达载体 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 645-648
• 页数: 4页
• 分类号: R392.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2006.05.002

摘要

目的从临床标本中获得沙眼衣原体(Ct)热休克蛋白(cHSP)10基因,构建真核表达重组质粒,利用脂质体体外转染Hela细胞,为研究cHSP10生物学功能和Ct核酸疫苗的研制做准备.方法用PCR技术从40例金标法阳性的临床标本中扩增cHSP10基因片断,重组入pMD18-T克隆载体.将pMD18-T/cHSP10外源基因片断经酶切鉴定后,克隆入pcDNA3.1(+)中,经过序列分析和酶切鉴定后,运用脂质体将该重组体转染Hela细胞,ELISA方法观察目的基因的表达.结果PCR扩增得到cHSP基因全长,大小为306bp,序列测定与GenBank(M58027)发布的序列一致;构建得到cHSP10基因真核表达载体;该真核表达载体在Hela细胞表达cHSP10.结论成功构建cHSP10基因真核表达载体,该重组质粒能在Hela细胞中表达cHSP10,为进一步研究cHSP10生物学功能和Ct核酸疫苗的研制提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红发	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	49	283	10.0	14.0
2	罗惠莉	华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科	2	0	0.0	0.0