鸡MxA基因的克隆、表达及生物学活性检测

• 作者: 常维山 江国托 陈蕾
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 鸡MxA基因 基因克隆 原核表达 生物活性
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 兽医免疫学
• 页码范围: 1018-1020,1024
• 页数: 4页
• 分类号: Q81
• 字数: 3469字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆鸡MxA基因,构建其原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达融合蛋白.方法:采用RT-PCR方法从鸡成纤维细胞(CEF)中扩增MxA,将其克隆至克隆载体pMD18-T中,筛选阳性克隆后回收目的片段,将其克隆入原核表达质粒pGEX-6p-1,构建其重组表达质粒pGEX-MxA,以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE、鸡胚新城疫病毒干扰试验和VSV-CEF微量细胞抑制试验进行分析、鉴定.结果:经RT-PCR扩增获得的MxA序列与GeneBank报道的序列一致,SDS-PAGE和干扰试验证实重组质粒可以表达出相应分子量为45 000的蛋白,与GST-MxA融合蛋白分子量一致.结论:成功完成了鸡MxA基因的克隆及其原核表达质粒的构建,在大肠杆菌DH5α中经IPTG诱导表达了融合蛋白GST-MxA,为进一步探讨MxA的生物学活性,探索抗病毒药物的研发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	常维山	山东农业大学动物科技学院	187	1558	20.0	33.0
2	江国托		47	174	7.0	12.0
3	陈蕾	山东农业大学动物科技学院	8	69	5.0	8.0