林麝IL-1β基因的克隆、表达及生物学活性检测

• 作者: 姜立春 杨东 邹丹丹 邹方东
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 林麝 IL-1β 原核表达 蛋白纯化 活性检测
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1734-1738
• 页数: 5页
• 分类号: S829.9|S813.1
• 字数: 3481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.11.006

摘要

旨在克隆和表达林麝IL-1β,为其用于林麝疾病的防治奠定基础.从林麝外周血单核细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增IL-1β(Interleukin-1β)基因.将IL-1β成熟肽编码序列连接到pET32a(+)原核表达载体进行表达,纯化目的蛋白并检测其生物学活性.序列分析表明,林麝IL-1β开放阅读框(ORF)长801 bp,编码266个氨基酸,且在反刍动物中高度保守.IPTG诱导林麝IL-1β融合蛋白(MB-rIL-1β)表达,得到约35 ku的目标带,且大部分以可溶形式存在.对上清蛋白分离纯化得到约35 ku的单一条带.细胞增殖试验结果显示,林麝IL-1β融合蛋白能明显促进小鼠成纤维细胞(L929)增殖,表明其具有生物学活性.运用大肠杆菌表达系统可高效可溶性表达具有生物学活性的MB-rIL-1β融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹方东		10	27	3.0	5.0
2	邹丹丹		1	1	1.0	1.0
3	杨东		2	5	1.0	2.0
4	姜立春		1	1	1.0	1.0