NIDD基因TaqMan探针的制备及其在实时荧光定量PCR方法中的应用

• 作者: 严美娟 史淑贤 沈勤 沈爱国 程纯 陈梦玲
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光定量PCR TaqMan探针 MDD 大鼠 脑
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 185-188
• 页数: 4页
• 分类号: R446.61|R338.1
• 字数: 3154字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2006.03.001

摘要

目的:制备NIDD基因TaqMan探针建立检测NIDD基因荧光定量PCR(FQ-PCR),以进一步研究NIDD的表达情况.方法:采用RT-PCR法,从出生后一天的SD大鼠脑组织mRNA中扩增NIDD基因的部分编码序列区(CDS)片段,克隆入pGEM-T载体,筛选阳性克隆、酶切鉴定及序列测定.采用TaqMan探针,以重组质粒为模板绘制标准曲线.结果:RT-PCR法扩增出一特异产物与预期长度112 bp相符,DNA序列测序的结果与GeneBank提供的已知序列(AB098078)比较,所克隆的NIDD基因片段与其中的112 bp完全相同,与NIDD基因100%同源.以重组质粒为模板绘制标准曲线,相关系数r大于0.99,反应效率显示为1,各点变异系数小于10%.结论:采用RT-PCR和T载体技术成功制备出可应用于FQ-PCR的NIDD基因TaqMan探针.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严美娟	南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室	33	47	4.0	5.0
2	沈爱国	南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室	83	212	8.0	10.0
3	史淑贤	南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室	8	12	3.0	3.0
4	沈勤	南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室	31	160	7.0	11.0
8	陈梦玲	南通大学基础医学院微生物与免疫学教研室	14	36	3.0	5.0