人端粒酶催化亚单位hTERT基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 周俊宜 廖亚平 张洁 汪华侨
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Alzheimer病 端粒酶 人端粒酶催化亚基 重组腺病毒
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 609-613
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4045字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7547.2006.06.004

摘要

为构建人端粒酶催化亚单位(hTERT)重组腺病毒载体,采用PCR法从pCI-neo-hTERT中钓取hTERT全长cDNA,定向克隆到pADTrack-CMV穿梭质粒.通过分步转化把pADEasy-1和重组穿梭质粒(pADTrack-hTERT)转化入BJ5183菌进行同源重组.hTERT重组腺病毒骨架质粒(pAD-hTERT)转染HEK293细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,收获重组腺病毒(AD-hTERT)提取DNA行PCR鉴定并扩增.经PCR、酶切和测序鉴定证实hTERT的cDNA正确插入穿梭质粒且与pADEasy-1正确同源重组;PCR鉴定及报告基因分析说明hTERT重组腺病毒包装正确且具有较好的感染活力.结果表明本研究已成功构建了hTERT重组腺病毒,为hTERT的神经保护作用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪华侨	中山大学基础医学院解剖学和脑研究室	159	1461	20.0	29.0
2	廖亚平	中山大学基础医学院解剖学和脑研究室	2	20	2.0	2.0
3	张洁	中山大学基础医学院解剖学和脑研究室	31	163	7.0	11.0
4	周俊宜	中山大学基础医学院解剖学和脑研究室	33	142	6.0	11.0