东亚钳蝎钙通道样毒素的克隆与其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 孔天翰 覃媛 顾少菊
• 来源期刊: 广州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 东亚钳蝎 钙通道毒素 融合表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2910字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-1836.2006.01.002

摘要

目的:克隆东亚钳蝎钙通道样毒素(BmCa)基因,并构建原核表达质粒,在大肠杆菌中重组表达该毒素蛋白.方法:以东亚钳蝎尾毒腺的总RNA为模板,通过RT-PCR技术,扩增并克隆BmCa的cDNA基因,并将该基因重组到PET-GST表达载体中,转化入大肠杆菌BL21并诱导表达,采用Ni-SuperChelating Resin柱亲和层析纯化,用小白鼠毒性实验检测融合蛋白的活性.结果:成功克隆BmCa基因并构建原核表达质粒,IPTG诱导后表达分子质量约为33KD的融合蛋白,含量为大肠杆菌总蛋白的25%,经亲和层析得较高纯度的融合蛋白,小白鼠毒性实验表明融合蛋白具有活性.结论:在大肠杆菌中成功表达了有活性的东亚钳蝎钙通道样毒素蛋白,为其功能研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔天翰	广州医学院蛇毒研究所	58	250	8.0	12.0
2	覃媛	广州医学院蛇毒研究所	14	71	4.0	8.0
3	顾少菊	广州医学院蛇毒研究所	6	83	3.0	6.0