人工合成苯丙氨酸脱氨酶基因在乳酸乳球菌中的食品级表达

• 作者: 刘敬忠 吕月平 肖白 苏畅 贾兴元 陈星 高斌
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 苯丙氨酸脱氨酶 苯丙氨酸 乳酸乳球菌 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 23-26
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2854字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2006.01.007

摘要

目的将人工合成具有乳酸菌偏好密码子的苯丙氨酸脱氨酶基因(PALart),在乳酸乳球菌中克隆并进行食品级表达,以期进一步用于治疗苯丙酮尿症的研究.方法以欧芹苯丙氨酸脱氨酶氨基酸序列为准,人工合成以乳酸菌偏爱密码子编码相同氨基酸序列的基因PALart,将该基因克隆到食品级乳酸乳球菌高效表达系统pNZ8149/NZ3900中而获得基因工程菌,用HPLC法测定诱导表达出的苯丙氨酸脱氨酶活性.结果获得了能表达苯丙氨酸脱氨酶活性的阳性克隆pNZ8149-PALart/NZ3900.该酶的表达量与诱导物乳链菌肽的浓度有关.反应液pH值能明显影响工程菌转化苯丙氨酸为肉桂酸的转化率;以10 mmol/L的苯丙氨酸作为底物,在pH8.0的磷酸盐缓冲液中,于37℃反应18 h,其转化率可达64%.结论获得具有活性OALart食品级表达的乳酸乳球菌株,为进一步将其制成口服制剂用于治疗经典型苯丙酮尿症模型动物的实验研究打下基础.