实时荧光定量PCR技术在鸭胚鸭瘟病毒检测中的应用

• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭瘟病毒 Real-time PCR 鸭胚 空斑试验
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医学
• 页码范围: 284-287
• 页数: 4页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3087字
• 语种: 中文

摘要

用real-time PCR技术定量栓测了鸭瘟标准强毒(DPV F37)和鸡胚化弱毒(C-KEC)疫苗毒在鸭胚中的动态分布.结果表明,F37在接种后3～45 h内胚体和绒毛尿囊膜中的病毒荷载量为7.43×10～5.01×103拷贝·μL-1,57～69 h达到平台期,为1.7×104～4.04×104拷贝·μL-1,接种后9～81 h尿囊液中的DPV荷载量始终在2.13～5.11×102拷贝·μL-1,胚体和绒毛尿囊膜中病毒荷载量高于尿囊液,病毒收获时间以接种后69～81 h为宜;C-KEC接种鸭胚后3 h尿囊液中病毒荷载量为7.6×103拷贝·μL-1,9 h下降至1.94×102拷贝·μL-1,21 h呈阴性,以后快速上升到平台期达9.16×103拷贝·μL-1;而绒毛尿囊膜在21 h前、胚体在45 h前的检测均为阴性,之后快速上升,均在69h达到平台期,为6.40×104·μL-1及4.14 × 104拷贝·μL-1,C-KEC在鸭胚绒毛尿囊膜及胚体中的含量同样高于尿囊液,收毒时间以接种后69～81 h为佳;对real-time PCR与空斑法两种定量检测结果进行相关性分析,结果显示,两者存在显著的直线相关,说明Real-time PCR技术完全可以替代空斑法定量检测DPV,并可将检测时间由144h缩短至3 h.