鸭疱疹病毒1型实时荧光定量PCR方法的建立

• 作者: 岳华 曾蔚 杨发龙 杨维青 谢轶 贾文祥
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 鸭疱疹病毒1型 鸭瘟 实时荧光定量PCR TaqMan
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 801-803,813
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 2523字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2006.05.036

摘要

目的 建立检测鸭疱疹病毒1型(鸭瘟病毒)的实时荧光定量PCR方法,为快速诊断、致病机理研究及抗病毒药物筛选等奠定基础.方法 根据病毒DNA聚合酶基因的序列,设计引物和探针,采用TaqMan探针技术进行实时荧光定量PCR,用含有125 bp扩增产物的pMD 18-T载体质粒为阳性对照,构建标准曲线,对该方法的特异性、可重复性、敏感性进行评价,同时与传统PCR方法进行比较研究.结果 标准曲线表明在2.3×105～2.3×10拷贝数之间有很好的线性关系(r=0.999);实时荧光定量PCR最少可检测到23个阳性质粒,说明有很好的敏感性;试验内及试验间变异系数分别为1.22～6.69以及2.09～8.84,说明有较好的重复性;对非鸭瘟病毒DNA无扩增,说明有很好的特异性;在对病毒DNA的检测方面,比传统PCR的敏感性高出104倍.结论 成功建立了针对鸭瘟病毒的特异、敏感、重复性强且可准确定量的实时荧光定量PCR方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢轶	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	60	250	9.0	12.0
2	贾文祥	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	49	412	11.0	17.0
3	曾蔚	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	23	240	8.0	15.0
4	杨维青	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	1	10	1.0	1.0