猫疱疹病毒Ⅰ型实时荧光定量 PCR方法的建立及初步应用

• 作者: 付瑞 卫礼 岳秉飞 巩薇 李晓波 王吉 王淑菁 贺争鸣
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 猫疱疹病毒Ⅰ型 实时荧光定量PCR 猫
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 47-54
• 页数: 8页
• 分类号: R33
• 字数: 4478字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671.7856.2014.012.010

摘要

目的：建立猫疱疹病毒I型（ FHV-1）实时荧光定量PCR检测方法，应用于实验用猫及临床患猫FHV-1的快速检测。方法根据已发表的FHV-1 TK基因序列设计特异引物和TaqMan探针，使用分子生物学方法制备质粒标准品，建立FHV-1实时荧光定量PCR方法，并对方法的线性、特异性、敏感性、及稳定性等进行测定。用建立的方法对48份猫临床样品进行检测。结果成功建立FHV-1实时荧光定量PCR方法；该方法的线性范围为（1×102～1×109）copies／μL，与单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-1）、犬疱疹病毒（CHV）、猪伪狂犬病毒（PRV）、猫细小病毒（ FPV）均无交叉反应，检测灵敏度可达到10 copies／μL。批内变异系数均小于5％。应用该方法从48份猫临床样本中检测出33份FHV-1核酸阳性。结论建立的FHV-1PCR检测方法具有特异、敏感及稳定的特点，适合于临床FHV-1的快速定量检测。