锦鲤疱疹病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 何俊强 刘荭 吕建强 岳志芹 江育林 范万红
• 来源期刊: 中国海洋大学学报(自然科学版)
• 学科: 农学
• 关键词: 锦鲤疱疹病毒 实时荧光定量PCR 检测
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 785-788,722
• 页数: 5页
• 分类号: S917.1|TS254.1
• 字数: 3540字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5174.2007.05.013

摘要

研究建立并完善了Taqman 实时荧光定量PCR检测锦鲤疱疹病毒(KHV)的方法.首先通过选取KHV病毒TK基因的保守序列(GenBank AB182940),利用PRIMER EXPRESS 2.0设计引物和探针.其中Taqman探针的5'端标记FAM,3'端标记TAMRA.然后利用梯度稀释的阳性样品克隆质粒进行定量PCR反应,制作标准曲线,得到病毒拷贝数与Ct值的关系为:Ct=-3.45 lgX+42.73(相关系数R2=0.989).通过试验检测得到实时荧光定量PCR对KHV的灵敏度为32个病毒核酸拷贝数,同时,设计的引物和探针对于鱼类细胞系和其它鱼类病毒没有扩增反应,表现出较好的特异性.实验结果表明,实时荧光定量PCR检测KHV的方法,具有特异性好、灵敏度高的特点,可以缩短检测时间,提高检测速度,非常适合口岸进出口检验检疫的要求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳志芹		54	250	9.0	13.0
2	刘荭		37	488	14.0	21.0
3	吕建强		16	116	6.0	10.0
4	何俊强		12	142	7.0	11.0
5	范万红		8	79	5.0	8.0
6	江育林		20	315	10.0	17.0