具生物学活性的重组鸡Leptin的制备

• 作者: 刘志 刘颖 施振旦 李孝伟 钟子穗
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡Leptin融合蛋白 表达和纯化 复性 生物活性
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 641-645
• 页数: 5页
• 分类号: S185|S188
• 字数: 3763字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2006.05.001

摘要

将鸡Leptin成熟肽的cDNA片段插入表达载体pRSET A的Nhe Ⅰ和Hind Ⅲ两位点之间,构建重组表达质粒pLep-SCAU2并转化大肠杆菌(Escherichia coli)菌株BL21(DE3),将重组菌在含氨苄青霉素100μg/mL的LB培养基中培养至OD600大于0.6之后,经IPTG 0.05mol/L诱导表达出分子量约为17.5 kD的含6×His标记的重组鸡Leptin,诱导4 h后表达量达最高,占总菌体蛋白的25%左右,且以包涵体形式存在.该重组鸡Leptin经50%Ni-NTA树脂纯化和透析复性折叠后分离出可溶性部分.对35日龄的矮脚黄鸡腹腔注射该可溶性重组鸡Leptin(2 mg/kg体重);注射后60 min内的采食量与对照组差异不显著(P＞0.05),但在注射后80～120min都显著低于对照组(P＜0.05).Leptin处理公鸡的采食量在注射2 h后逐渐上升并在5.5 h时与对照组公鸡相同.但Leptin处理母鸡的采食量持续受到抑制,在注射后5.5 h时仍然显著低于对照组母鸡(P＜0.01).表明所表达的重组鸡Leptin能显著抑制鸡的采食量(母鸡比公鸡效果更为明显),证明所制备的重组鸡Leptin融合蛋白具有生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施振旦	华南农业大学动物科学学院	76	873	18.0	24.0
2	李孝伟	华南农业大学动物科学学院	9	80	4.0	8.0
3	刘颖	华南农业大学动物科学学院	42	207	8.0	12.0
4	钟子穗	华南农业大学动物科学学院	5	4	1.0	2.0
5	刘志	华南农业大学动物科学学院	4	57	3.0	4.0