癌胚抗原启动子调控融合自杀基因yCDglyTK载体的构建及其应用研究

• 作者: 何青春 余术宜 刘霆 张桂英 徐美华 程军平 陈玉祥
• 来源期刊: 中国医学工程
• 学科: 医学
• 关键词: 癌胚抗原 纳米载体 自杀基因 增强子 结肠癌
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 120-124
• 页数: 5页
• 分类号: R730.51
• 字数: 4148字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2019.2006.02.003

摘要

目的构建靶向性基因治疗载体pcDNA3.1(-)CVyCDglyTK,研究癌胚抗原(CEA)启动子是否能控制新型融合自杀基因yCDglyTK在CEA阳性结肠癌细胞中专一性表达和杀伤作用.方法采用PCR、RT-PCR、融合PCR、酶切、连接等技术构建由CEA启动子、CMV增强子驱动的融合自杀基因pcDNA3.1(-)CVyCDglyTK表达载体和分别由CEA启动子和巨细胞病毒(CMV)增强子驱动的融合自杀基因pcDNA3.1(-)CEAyCDglyTK、pcDNA3.1(-)CMVyCDglyTK表达载体,以磷酸钙纳米为载体分别转染CEA阳性的人结肠癌细胞株LOVO细胞和CEA阴性的Hela细胞,采用RT-PCR、免疫荧光法检测感染细胞中yCDglyTK基因的表达,并用MIT法检测感染后细胞对5-氟胞嘧啶(5-FC)的敏感性.结果LOVO细胞在感染以上三种质粒表达载体后均有yCDglyTK mRNA表达,且对5-FC的敏感性明显增强,Hela细胞在纳米-pcDNA3.1(-)CMVyCDglyTK复合物感染后有yCDglyTK mRNA表达,对5-FC的敏感性增强,而在纳米-pcDNA3.1(-)CEAyCDglyTK及纳米-pcDNA3.1(-)CVyCDglyTK复合物感染后则没有yCDglyTK mRNA表达,5-FC对其亦无杀伤作用.结论该实验构建的由CEA启动子、CMV增强子驱动的融合自杀基因yCDglyTK靶向性基因治疗载体,能使融合自杀基因在CEA阳性细胞中专一性表达,从而达到靶向治疗肿瘤的目的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张桂英	中南大学湘雅医院消化内科	215	1229	17.0	23.0
2	徐美华	中南大学湘雅医院消化内科	37	264	10.0	14.0
3	陈玉祥	中南大学生物科学与技术学院	42	350	8.0	17.0
4	刘霆	中南大学湘雅医院消化内科	34	212	7.0	14.0
5	何青春	中南大学湘雅医院消化内科	9	42	4.0	6.0
6	余术宜	中南大学生物科学与技术学院	12	72	5.0	8.0
7	程军平	中南大学生物科学与技术学院	4	18	3.0	4.0