Ⅰ型单纯疱疹病毒gD基因片段的高效表达及抗原性分析

• 作者: 易俊波 李凌云 陈少娟 雷明军 黄德新
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单纯疱疹病毒 糖蛋白gD 基因克隆 质粒表达
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 49-53
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3592字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2006.05.010

摘要

目的:获得高表达的Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV)被膜糖蛋白gD(简称gD1)基因的工程菌.方法:通过计算机分析,筛选出疱疹病毒gD1中优势抗原决定簇的基因片段.将克隆的基因片段插入表达载体pTrxA内,转化大肠杆菌Rosetta,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物.结果:PCR扩增出约930bp的gD1编码基因目的片段,与预期片段大小相符,经测序鉴定无基因突变.所构建pTrxA-gD1重组表达质粒阳性克隆经PCR与双酶切鉴定,与预期结果一致.含有pTrxA-gD1重组质粒的大肠杆菌Rosetta诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE显示表达产物约48kDa.免疫印迹结果表明表达产物具有较好的抗原性.结论:成功构建了pTrxA-gD1表达质粒,实现了成熟gD1蛋白在大肠杆菌中的高效表达,表达产物具有好的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄德新		3	60	2.0	3.0
2	易俊波		3	60	2.0	3.0
3	李凌云		3	60	2.0	3.0
4	雷明军		1	0	0.0	0.0
5	陈少娟		1	0	0.0	0.0