携带人白细胞介素18基因的复制缺陷型腺病毒载体的构建、鉴定和滴度测定

• 作者: 毛立军 裴东生 郑典宝 郑宏祥 郑骏年 郝林
• 来源期刊: 徐州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 白细胞介素18 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 95-97
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 2236字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2065.2006.02.001

摘要

目的构建人白细胞介素18(IL-18)基因复制缺陷型腺病毒表达载体.方法以质粒pJWIL-18为模板,设计并合成上、下游引物,利用多聚酶链反应(PCR)扩增获得IL-18基因片段,酶切后克隆至pCA13质粒,构建重组质粒pCA13 IL-18.鉴定正确后,将pCA13 IL-18与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染HEK293细胞,9～12天出现病毒空斑.提取重组腺病毒的DNA,进行PCR鉴定.大量扩增后,氯化铯梯度离心纯化腺病毒,测病毒滴度.结果酶切分析、序列测定、PCR验证表明,IL-18基因成功克隆到复制缺陷型腺病毒载体中.结论成功构建了表达人IL-18基因的复制缺陷性腺病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑骏年	徐州医学院附属医院泌尿外科	114	335	9.0	11.0
2	裴东生	徐州医学院生物化学与分子生物学中心	6	4	1.0	2.0
3	毛立军	徐州医学院附属医院泌尿外科	56	141	6.0	8.0
4	郝林	徐州医学院附属医院泌尿外科	4	16	3.0	4.0
5	郑宏祥	徐州医学院附属医院泌尿外科	6	22	4.0	4.0
6	郑典宝	徐州医学院附属医院泌尿外科	2	3	1.0	1.0