携带人白细胞介素10和肝细胞生长因子双基因的重组腺病毒载体构建与鉴定

• 作者: 方琳 曹祥荣 朱月蓉 江淑芳 苏长青 邢继成 邱红
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 白细胞介素10 肝细胞生长因子 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 检验医学
• 页码范围: 42-45,60
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 字数: 3436字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2010.01.011

摘要

目的: 构建携带人白细胞介素10(hIL-10)和人肝细胞生长因子(hHGF)双基因的重组腺病毒载体.方法: 分别以pDC316-hIL10-EGFP和pCDNA3-hHGF重组质粒为模板,PCR扩增获得hIL-10和hHGF基因片段,与pIRES连接成为hIL10-IRES-hHGF,测序正确后酶切,与pDC315连接,获得穿梭质粒pDC315-hIL10-IRES-hHGF,与腺病毒包装系统转染293细胞,包装产生重组腺病毒hIL10-hHGF,PCR鉴定后,扩增病毒,并测定病毒滴度.用重组腺病毒转染BEL-7402和WRL-68细胞,ELISA法检测上清液中hIL-10和hHGF的含量.结果: 成功构建了重组腺病毒hIL10-hHGF,扩增纯化后测得重组腺病毒滴度为1×109 pfu/ml,转染BEL-7402和WRL-68细胞72 h后,表达hIL-10的量分别为(6 271.7±5.2) pg/ml和(350.6±12.4) pg/ml,表达hHGF的量分别为(20 827.1±345.5) pg/ml和(201.6±10.1) pg/ml.结论: 本实验为进一步研究Ad-hIL10-hHGF在动物体内抗肝炎、肝纤维化作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏长青	上海第二军医大学东方肝胆外科医院病毒及基因治疗实验室	8	22	3.0	4.0
2	方琳	南京师范大学生命科学学院	2	6	2.0	2.0
3	曹祥荣	南京师范大学生命科学学院	65	388	11.0	17.0
4	江淑芳	南京八一医院生化科	6	35	2.0	5.0
5	邱红	南京八一医院生化科	1	3	1.0	1.0
6	朱月蓉	南京八一医院生化科	1	3	1.0	1.0
7	邢继成	南京八一医院生化科	1	3	1.0	1.0