人骨形态发生蛋白7重组腺病毒的制备及在骨髓基质干细胞中的表达

• 作者: 吴岳嵩 徐卫东 毕霞 袁扬 黄盛东 龚德军
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形态发生蛋白质类 重组腺病毒 骨髓祖代细胞
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 1023-1025
• 页数: 3页
• 分类号: R349.6
• 字数: 2907字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2006.09.025

摘要

目的:构建骨形态发生蛋白7(BMP-7)和绿色荧光蛋白(GFP)融合基因的重组腺病毒载体,并检测其在骨髓基质干细胞(BMSCs)的表达.方法:RT-PCR法获得BMP-7基因.将其克隆至pcDNA3.1/CT-GFP质粒中,PCR扩增hBMP-7/GFP融合基因片段,与线性化pAxCAwt腺病毒载体连接,转染大肠杆菌LE392,筛选重组腺病毒黏粒,大量扩增后与DNA-TPC共转HEK293细胞,获得重组腺病毒Ad.hBMP-7/GFP.用重组病毒液转染兔BMSCs细胞,免疫组化方法检测BMP-7的表达.结果:经过多聚酶链反应及酶切鉴定证明获得了BMP-7重组腺病毒基因组,并包装出重组腺病毒,滴度为4.4×108pfu/ml.荧光显微镜和免疫组织化学证明BMP-7在重组腺病毒转染后的BMSC细胞中得到了表达.结论:成功制备BMP-7重组腺病毒,为骨缺损局部基因治疗研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐卫东	第二军医大学长海医院骨科	76	640	14.0	22.0
2	黄盛东	第二军医大学长海医院胸心外科	115	469	11.0	15.0
3	袁扬	第二军医大学长海医院胸心外科	34	86	5.0	6.0
4	龚德军	第二军医大学长海医院胸心外科	48	127	6.0	7.0
5	吴岳嵩	第二军医大学长海医院骨科	57	619	14.0	23.0
6	毕霞	第二军医大学长海医院康复医学科	13	177	6.0	13.0