小鼠OB基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 吕良炬 宋岳强 左正宏 王诚 陈奕欣
• 来源期刊: 厦门大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: OB基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 863-866
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3950字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-0479.2006.06.031

摘要

利用RT-PCR技术从小鼠脂肪组织中扩增了OB基因,并利用定向克隆技术克隆至原核表达载体pTO-T7.将构建好的质粒导入表达型大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行Western-blot检测.表达产物利用亲和层析技术进行纯化.结果显示:表达的带有his标签的小鼠leptin融合蛋白,分子量约为20 ku.0.5 mmol/L的IPTG在37℃诱导2.5 h时,leptin融合蛋白的表达量达到最大,达菌体总蛋白50%以上.表达产物经过纯化,纯度可达90%以上.Western-blot杂交显示,小鼠leptin融合蛋白有很强的抗原特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	左正宏	厦门大学生命科学学院	46	480	13.0	20.0
2	陈奕欣	厦门大学生命科学学院	40	567	15.0	22.0
3	王诚	厦门大学生命科学学院	9	48	2.0	6.0
4	吕良炬	厦门大学生命科学学院	13	181	7.0	13.0
5	宋岳强	厦门大学生命科学学院	3	45	2.0	3.0