pIRES2-HPV18E2-EGFP质粒重组及其在HeLa细胞中的表达

• 作者: 吕凤林 李元朝 李力 汪云
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒18型 E2基因 基因重组 转染
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1280-1282
• 页数: 3页
• 分类号: R394-33|R394.2|R730.261
• 字数: 2860字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.12.004

摘要

目的构建人乳头瘤病毒18型E2基因片段(HPV18E2)重组表达质粒并予以表达,为进一步研制HPV18相关疾病提供材料.方法以重组质粒(pBR322-HPV18)为模板,PCR方法扩增HPV18E2DNA片段,将HPV18E2DNA与加强绿色荧光质粒(pIRES2-EGFP)重组构建重组质粒(pIRES2-HPV18E2- EGFP).用酶切电泳及测序检查质粒重组后序列正确性.重组质粒转染Hela细胞.RT-PCR鉴定转染细胞中E2基因.结果 PCR扩增DNA片段约为1 kb,与预期结果相同.克隆重组质粒pIRES2-HPV18E2- EGFP酶切后显示的酶切图谱与预期相同,而且测序验证插入片段全序列无改变.转染并用G418筛选后,在荧光显微镜下可见绿色荧光细胞的表达.转染细胞RT-PCR出现特异性条带.结论成功构建表达HPV18 E2蛋白的靶细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李力	第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科	325	2225	23.0	32.0
2	汪云	第三军医大学大坪医院野战外科研究所妇产科	10	13	2.0	3.0