日本脑炎病毒基因片段-GM-CSF双顺反子表达载体的构建

• 作者: 万颖杰 安静 张俊磊 彭涛 李东英 王嘉丽 田衍平 陈宗涛 陈炜 高娜
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 日本脑炎病毒 GM-CSF pCAG-JG
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1019-1021
• 页数: 3页
• 分类号: Q782|R737.31|R394-33
• 字数: 3558字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.10.007

摘要

目的利用分子生物学技术,构建pCAG-JG双顺反子真核表达质粒,为研制新型的日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)核酸疫苗奠定基础.方法 RT-PCR扩增JEV的prM-E-NS1和小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulatingfactor,GM-CSF)后,分别克隆人中间载体pIRES,经酶切获得prM-E-NS1-IRES-GM-CSF片段,并将其插入pCAGGSP7质粒,鉴定阳性重组子.结果成功的将prM-E-NS1-IRES-GM-CSF片段插入到pCAGGSP7质粒,测序鉴定结果正确,该质粒命名为pCAG-JG.结论成功的构建了pCAG-JG双顺反子真核表达质粒.