真菌免疫调节蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗体制备

• 作者: 曾林 李彦舫 林忠平 白杰英
• 来源期刊: 实用医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 免疫调节蛋白 原核表达 ELISA法
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1205-1207
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2042字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4008.2006.10.033

摘要

目的 通过在大肠杆菌中表达真菌免疫调节蛋白LZ-8,以制备高效价的抗体.方法 将所克隆的LZ-8基因构建成原核表达载体pET-30a-lz8,转化入大肠杆菌BL21感受态细胞中,经IPTG诱导其表达;原核表达产物经金属镍离子螯合柱纯化后,采用常规方法制备家兔多克隆抗体,并用间接ELISA法测定阳性血清的效价.结果 大肠杆菌表达产物经SDS-PAGE电泳检测到相对分子量约为14ku的目的蛋白;用考马斯亮兰法测定所表达的外源蛋白表达量为34.46mg/L;纯化后的目的蛋白免疫家兔后,经间接ELISA检测阳性血清的稀释比例达到了104,证明该蛋白具有良好的抗原性.结论 真菌免疫调节蛋白LZ-8能够在大肠杆菌中获得高水平的表达,且获得了高效价的家兔多克隆抗体,为以后对该蛋白的功能研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林忠平	北京大学蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室	85	1501	24.0	36.0
2	曾林		31	271	10.0	16.0
3	李彦舫	吉林大学农学部植物科学学院	21	179	8.0	12.0
4	白杰英	吉林大学农学部植物科学学院	4	53	3.0	4.0