猪传染性胃肠炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 冯力 吴波平 孙东波 时洪艳 白兴华 陈建飞 高秀春
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 TaqMan探针 荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 476-481
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65|S854.43
• 字数: 3591字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2007.05.011

摘要

根据猪传染性胃肠炎病毒和猪肌动蛋白的基因序列设计合成了引物和探针,通过对荧光定量RT-PCR反应条件的优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测TGEV的方法.同时对37份现地病料进行检测并与常规RT-PCR方法、TGEV抗原快速检测试剂盒比较.结果,该方法的检测敏感性达到15.3拷贝/μL,且具有很好的特异性和重复性,而常规RT-PCR方法只能检测到1.53×103 拷贝/μL.对37份现地病料的检测结果也表明该法(检出17份)比常规RT-PCR方法(检出12份)和TGEV抗原快速检测试剂盒(免疫层析法,检出10份)的敏感性高.