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摘要:
目的:制备用于nm23-H1基因mRNA实时荧光定量PCR检测的质粒标准品.方法:通过PCR扩增出目的片断,纯化后T-A连接至pMD18-T载体,转化宿主菌E.coli DHSα,获得阳性克隆;通过PCR扩增、双酶切鉴定和测序分析,确认重组质粒完整正确;大量抽提重组质粒,测定其拷贝浓度,10倍稀释成梯度标准品,并进行荧光定量PCR检测分析.结果:nm23-H1基因目的片段成功重组至pMD18-T载体上,获得的重组质粒保持了目的片段的特异性和序列完整性.梯度浓度标准质粒的荧光定量PCR结果显示,循环阈值(Ct)与起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系.结论:成功构建了nm23-H1基因实时荧光定量PCR质粒标准品.
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nm23-H1
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文献信息
篇名 nm23-H1基因实时荧光定量PCR标准质粒的构建
来源期刊 中国卫生检验杂志 学科 医学
关键词 nm23-H1基因 实时荧光定量PCR 重组质粒 标准品
年,卷(期) 2007,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 604-605,615
页数 3页 分类号 R446.1
字数 2440字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1004-8685.2007.04.013
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研究主题发展历程
节点文献
nm23-H1基因
实时荧光定量PCR
重组质粒
标准品
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国卫生检验杂志
半月刊
1004-8685
41-1192/R
大16开
郑州市经一路12号
80-152
1991
chi
出版文献量(篇)
21668
总下载数(次)
39
相关基金
中国博士后科学基金
英文译名:China Postdoctoral Science Foundation
官方网址:http://www.chinapostdoctor.org.cn/index.asp
项目类型:
学科类型:
论文1v1指导