小鼠 Bax 基因实时荧光定量 PCR 标准品质粒的构建

• 作者: 付文卓 潘博 潘耀谦 王继宏 蔡青 鲁强
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: Bax基因 实时荧光定量PCR 标准品质粒 标准曲线
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 64-68
• 页数: 5页
• 分类号: Q343.1
• 字数: 3651字
• 语种: 中文

摘要

为了能够快速、准确定量小鼠 Bax 基因的 mRNA，构建了小鼠 Bax 基因的标准品质粒和标准曲线。根据 GenBank 中小鼠基因编码区保守序列，设计特异性引物，从 N2a 细胞中提取总 RNA，利用 RT-PCR 技术扩增该基因162 bp 的核苷酸片段，经纯化、连接和转化后，提取质粒并进行酶切、测序鉴定；将阳性重组质粒10倍递减稀释作为标准模板，通过 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量 PCR 方法，建立了 Bax 标准曲线及直线回归方程。结果表明产物熔解曲线峰值单一，引物特异性高；标准曲线相关系数 R2＝0．999，表明线性关系好。本试验成功构建了目的基因 Bax 的标准品质粒和标准曲线。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	付文卓	首都医科大学医学实验与测试中心	7	9	2.0	3.0
2	潘耀谦	河南科技学院动物科学学院	65	222	8.0	11.0
3	蔡青	首都医科大学医学实验与测试中心	38	138	6.0	10.0
4	鲁强	首都医科大学医学实验与测试中心	30	143	8.0	10.0
5	王继宏	中国农业大学动物医学院国家动物海绵状脑病实验室	5	14	1.0	3.0
6	潘博	河南科技学院动物科学学院	2	0	0.0	0.0