羊痘病毒和羊口疮病毒二重PCR鉴别检测方法的建立

• 作者: 刘棋 朱伟 熊毅 邹联斌 郑敏 郭建刚 金宁一 陈义祥
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 二重PCR 羊痘病毒 羊口疮病毒 诊断
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 931-934
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 3808字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.11.005

摘要

针对羊痘病毒(capripoxvirus,CaPV)的A29L基因和羊口疮病毒(orf virus,ORFV)的H3L基因,设计、合成了2对特异性引物以进行二重PCR.结果表明,该方法可以在数小时、在同一反应体系中清晰地区分CaPV和ORFV,其PCR产物大小分别为413 bp和708 bp,与预期的片段大小相符,序列分析证实目的基因序列与已发表的序列一致;该检测方法的灵敏度可达1个病毒蚀斑形成单位(PFU).采用二重PCR对12株CaPV、ORFV和相关病毒、细菌培养物,以及22份田间样品进行检测,与预期结果完全一致,且与相关病毒或健康羊组织样品无交叉反应.结果表明,该方法具有快速、敏感、特异等优点,可作为临床样品中CaPV和ORFV的鉴定和诊断的有效方法.