腺病毒-tk基因同源重组系统构建的研究

• 作者: 兰平 周军 宋新明 徐鋆耀 汪建平 王磊
• 来源期刊: 岭南现代临床外科
• 学科: 医学
• 关键词: tk基因 腺病毒 基因治疗
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 81-84
• 页数: 4页
• 分类号: R342.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-976X.2007.02.001

摘要

目的 研制能快速高效地构建携带外源目的基因tk的重组腺病毒细菌内同源重组系统.方法 将pBluescriptⅡKDR-tk、ptrack与ptrackCMV质粒转化感受态细菌后扩增,通过PmeⅠ酶线性化穿梭载体ptrackCMV-tk,然后将线性化的穿梭载体ptrackCMV-tk与pAdeasy-1进行重组构建成重组腺病毒质粒;利用整合入重组病毒质粒中的绿色荧光蛋白分别筛选重组后的腺病毒质粒.结果 PCR和RT-PCR分析外源基因的表达证实tk基因在DNA和mRNA水平上均能有效表达;荧光显微镜下观察计数GFP阳性细胞数,计算病毒滴度为1.1 × 1011pfu/L.结论 细菌内同源重组系统能快速高效地构建携带外源目的基因tk的重组腺病毒;绿色荧光蛋白方便早期证实腺病毒的产生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王磊	中山大学附属第一医院胃肠胰外科	89	527	11.0	19.0
2	兰平	中山大学附属第一医院胃肠胰外科	112	639	14.0	20.0
3	周军	中山大学附属第二医院胃肠胰外科	71	555	13.0	20.0
4	汪建平	中山大学附属第一医院胃肠胰外科	141	1371	20.0	31.0
5	宋新明	中山大学附属第一医院胃肠胰外科	39	201	8.0	13.0
6	徐鋆耀	中山大学附属第二医院胃肠胰外科	30	151	8.0	11.0