黑腹果蝇抗真菌肽Drs及其同系物基因的原核表达与蛋白纯化研究

• 作者: 叶明强 夏庆友 曹阳 杨婉莹 温硕洋 邓小娟 黄亚东
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 黑腹果蝇 抗真菌肽 Drosomycin 同系物 表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 391-398
• 页数: 8页
• 分类号: S8
• 字数: 7506字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2007.02.025

摘要

[目的]Drosomycin(Drs)是从黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)中鉴定发现的对丝状真菌有广谱抗性的抗真菌肽因子,此外,在黑腹果蝇基因组中,还存在另外6条Drs同系物的基因序列,对它们推导的氨基酸序列具有与Drs相同的保守位点和CSαβ模体结构.为鉴定Drs及其6个同系物的抗性功能差异,研究其分子结构与功能的关系,需要对这些同系物基因进行克隆表达,获得有生物学活性的纯化样品.[方法]本文采用PCR分段互补合成的方法准确地获得了Drs同系物基因,并克隆至pET-3C载体上,转化到宿主菌E.coli Origami(DE3)中进行诱导表达,表达产物经阳离子CM SepharoseTM Fast Flow层析、凝胶过滤Sephacryl S-100 High Resolution层析和包涵体的复性及Sephadex G-25脱盐等纯化处理后,进行抑菌活性检测.[结果]经纯化的7个Drs同系物的短肽样品,除Drs-lI外,其它的Drs同系物样品对供试真菌水稻立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)均有较强的抑制作用.[结论]表明本研究中使用的纯化及复性方法对具有多个二硫键的小分子多肽是比较有效的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	温硕洋	华南农业大学资源环境学院昆虫学系	18	402	10.0	18.0
2	曹阳	华南农业大学动物科学学院蚕丝科学系	35	430	11.0	19.0
3	夏庆友	西南大学蚕学与生物技术学院农业部蚕桑学重点实验室	103	602	14.0	20.0
4	邓小娟	华南农业大学动物科学学院蚕丝科学系	19	165	7.0	12.0
5	杨婉莹	华南农业大学动物科学学院蚕丝科学系	22	176	6.0	12.0
6	叶明强	华南农业大学动物科学学院蚕丝科学系	3	38	3.0	3.0
7	黄亚东	曁南大学医药生物技术研究开发中心	2	8	2.0	2.0