人BTC蛋白表达及生物学活性鉴定

• 作者: 苏青 董艳 陈寒蓓
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: β细胞素 克隆 表达载体 纯化蛋白质
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 185-188
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R459.9|R587.1
• 字数: 3164字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2007.02.017

摘要

目的 获得大量具有生物活性的人成熟β细胞素(BTC)蛋白.方法 以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,PCR扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列,并按读框克隆入原核细胞表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a(+)-hBTC.重组质粒转化大肠杆菌BL21,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导及亲和层析法纯化获得融合蛋白,运用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.以不同浓度BTC连续5 d作用于NIH3T3细胞,MTT比色法检测细胞增殖能力.结果 融合蛋白以水溶性形式分泌于大肠杆菌BL-21胞浆中,其作用于NIH3T3细胞可明显促进细胞增殖.结论 人成熟BTC蛋白在pET32a(+)表达系统中得到高效表达,所纯化蛋白具有促进NIH3T3细胞体外增殖的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈寒蓓	上海交通大学医学院新华医院内分泌科	9	24	2.0	4.0
2	董艳	上海交通大学医学院新华医院内分泌科	40	131	7.0	8.0
3	苏青	上海交通大学医学院新华医院内分泌科	92	264	8.0	13.0