PSNAV2-CTGF重组质粒构建及其在人胚肾293细胞中的表达

• 作者: 王德春 胡有谷 魏见伟
• 来源期刊: 青岛大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结缔组织生长因子 腺相关病毒 质粒 基因转染 椎间盘
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 377-379,382
• 页数: 4页
• 分类号: R68|R37-33
• 字数: 3327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4488.2007.05.001

摘要

目的 构建含人结缔组织生长因子(CTGF)的腺相关病毒(AAV)表达载体,并观察其在人胚肾293(HEK293)细胞中的表达.方法 以含有人CTGF基因序列的质粒pCMV-SPORT6为模板,应用PCR克隆出CTGF基因,采用分子克隆的方法把CTGF克隆到AAV表达载体pSNAV2.0上构建重组质粒pSNAV2-CTGF.把重组质粒转染HEK293细胞,用免疫荧光法对重组质粒目的蛋白的表达进行研究,MTT法检测细胞培养上清液中CTGF蛋白的生物学活性.结果 成功构建完全正确的CTGF基因序列的AAV表达载体pSNAV2-CTGF,将其转染HEK293细胞后,免疫荧光检测到目的蛋白的表达,转染后的细胞上清具有促使成纤维细胞增殖的生物学活性.结论 成功构建了真核表达载体pSNAV2-CTGF,转染HEK293细胞后能够表达具有生物学活性的CTGF蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡有谷	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	120	1086	17.0	28.0
2	王德春	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	45	235	9.0	13.0
3	魏见伟	青岛大学医学院附属医院脊柱外科	7	28	3.0	5.0