pCMV －Myc －MyD88重组质粒构建及其在293 T细胞中的表达

• 作者: 何雅军 刘志河 吕霞 宋慧东 沈雁 潘洁 舒建昌 邓延梅
• 来源期刊: 广东医学
• 关键词: MyD88 重组质粒 293T细胞
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1634-1636
• 页数: 3页
• 字数: 2673字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建髓样分化因子88（MyD88）真核表达质粒，并检测其在293T细胞中的表达，为进一步研究应用奠定实验基础。方法从大鼠肝星状细胞株T－6中提取总RNA，应用PCR技术扩增MyD88基因编码序列片段，克隆入真核表达载体pCMV－Myc质粒中，对重组质粒经酶切和测序鉴定后，以钙离子转染法转染至293T细胞中，采用Western blot的方法检测MyD88蛋白的表达，以观察转染及表达效果。结果酶切及测序结果证明pCMV－Myc－MyD88重组质粒的DNA序列正确，将其转染至293T细胞后，MyD88蛋白表达明显增加。结论pCMV－Myc－MyD88重组质粒构建成功，并能在293T细胞中表达，为进一步研究针对MyD88分子的疾病治疗及其生物学功能奠定了实验基础。