重组HBsAg-GFP载体的构建及其在293T细胞中的表达

• 作者: 刘璇 吴砂 肖强 蒋小滔
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 乙肝表面抗原 真核表达 转基因鼠 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2013,（20）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 3304-3306
• 页数: 3页
• 字数: 3010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2013.20.014

摘要

目的:构建pCMV-HBsAg-GFP真核表达载体,鉴定重组蛋白在293T细胞中的表达及抗原性.方法:以HBV转基因鼠C57BL/6J-TgN(AlblHBV)44Bri基因组DNA为模板扩增HBsAg基因片段,并将其插入到带绿色荧光蛋白标签的真核表达载体pCMV-AC-GFP.通过阳离子聚合物将重组质粒pCMV-HBsAg-GFP转入293T细胞,荧光显微镜观察重组蛋白的表达,ELISA和Western Blotting鉴定其抗原性.结果:1％琼脂糖凝胶电泳结果显示,PCR扩增片段大小符合HBsAg基因699 bp的理论值.重组质粒经PCR、酶切鉴定后也与理论值相符.荧光显微镜显示,转染293T细胞48 h后,约50％呈亮绿色,细胞形态好,荧光表达强度高.ELISA和Western Blotting鉴定结果均为阳性.结论:成功构建了pCMV-HBsAg-GFP真核表达质粒,其表达的重组蛋白与天然HBsAg具有相同的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋小滔	南方医科大学基础医学院免疫学教研室	8	18	3.0	3.0
2	吴砂	南方医科大学基础医学院免疫学教研室	20	17	2.0	3.0
3	刘璇	南方医科大学南方医院儿科	5	7	1.0	2.0
4	肖强	南方医科大学基础医学院免疫学教研室	2	1	1.0	1.0