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摘要:
目的:构建pCMV-HBsAg-GFP真核表达载体,鉴定重组蛋白在293T细胞中的表达及抗原性.方法:以HBV转基因鼠C57BL/6J-TgN(AlblHBV)44Bri基因组DNA为模板扩增HBsAg基因片段,并将其插入到带绿色荧光蛋白标签的真核表达载体pCMV-AC-GFP.通过阳离子聚合物将重组质粒pCMV-HBsAg-GFP转入293T细胞,荧光显微镜观察重组蛋白的表达,ELISA和Western Blotting鉴定其抗原性.结果:1%琼脂糖凝胶电泳结果显示,PCR扩增片段大小符合HBsAg基因699 bp的理论值.重组质粒经PCR、酶切鉴定后也与理论值相符.荧光显微镜显示,转染293T细胞48 h后,约50%呈亮绿色,细胞形态好,荧光表达强度高.ELISA和Western Blotting鉴定结果均为阳性.结论:成功构建了pCMV-HBsAg-GFP真核表达质粒,其表达的重组蛋白与天然HBsAg具有相同的抗原性.
内容分析
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文献信息
篇名 重组HBsAg-GFP载体的构建及其在293T细胞中的表达
来源期刊 实用医学杂志 学科
关键词 乙肝表面抗原 真核表达 转基因鼠 绿色荧光蛋白
年,卷(期) 2013,(20) 所属期刊栏目 实验研究
研究方向 页码范围 3304-3306
页数 3页 分类号
字数 3010字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1006-5725.2013.20.014
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 蒋小滔 南方医科大学基础医学院免疫学教研室 8 18 3.0 3.0
2 吴砂 南方医科大学基础医学院免疫学教研室 20 17 2.0 3.0
3 刘璇 南方医科大学南方医院儿科 5 7 1.0 2.0
4 肖强 南方医科大学基础医学院免疫学教研室 2 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
乙肝表面抗原
真核表达
转基因鼠
绿色荧光蛋白
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
实用医学杂志
半月刊
1006-5725
44-1193/R
大16开
广州市越秀区惠福西路进步里2号之6
1972
chi
出版文献量(篇)
33647
总下载数(次)
22
总被引数(次)
193648
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