华山松对疱锈菌感性遗传分析的ISSR-PCR反应体系建立及引物筛选

• 作者: 刘文赞 普晓兰 杨岳先 蒙进芳
• 来源期刊: 西南林学院学报
• 学科: 农学
• 关键词: 华山松 ISSR 分子标记 华山松疱锈病
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 生物科学与技术
• 页码范围: 41-45
• 页数: 5页
• 分类号: S791.241.07
• 字数: 4025字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1914.2007.02.011

摘要

用采自云南华山松疱锈病3个典型发病点的华山松植株样品,组成健康株组和感病株组进行ISSR-PCR反应体系的建立和引物筛选.构建的华山松ISSR-PCR最优反应体系为:反应总体积25 μL,其中含10×Buffer 2.5 μL,Taq DNA polymerase 0.3 μL(终浓度1.5 U),Primer 2.0μL(终浓度2.0 μmol/L),DNA Template 5.0 μL(终浓度1.5 ng/μL),Mg2+ 2.5 μL(终浓度2.5 mmol/L),dNTP 2.5 μL(终浓度250 μmol/L),ddH2O 10.2 μL.扩增反应程序为:94 ℃预变性5 min,94 ℃变性30 s,47 ℃左右退火45 s,72 ℃延伸2 min,40个循环,最后在72 ℃F继续延伸10 min.通过初筛和中试筛选出扩增反应清晰、扩增稳定的10个引物作扩大实验,在健康株组和感病株组的两个DNA pool之间有明显的PCR扩增条带多态性.筛选出的ISSR引物可提供研究华山松种群差异的遗传标记.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	普晓兰	西南林学院资源学院	26	399	13.0	19.0
2	蒙进芳	西南林学院资源学院	9	27	2.0	4.0
3	刘文赞	西南林学院资源学院	1	4	1.0	1.0
4	杨岳先	西南林学院资源学院	1	4	1.0	1.0