用重叠PCR合成植物甜蛋白brazzein基因

• 作者: 陈波
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 植物甜蛋白 brazzein基因 合成 重叠PCR 泡盛曲霉
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 43-45
• 页数: 3页
• 分类号: Q781
• 字数: 2608字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2007.04.015

摘要

目的:为在泡盛曲霉(Aspergillus awamori)中进行表达,采用重叠PCR合成了植物甜蛋白brazzein基因.方法:根据非洲热带植物Pentadiplandra brazzeana产生的天然甜蛋白brazzein的氨基酸序列及泡盛曲霉糖化酶基因glaA的密码子偏爱性,设计并化学合成了2对3'-端互补的寡聚核苷酸,通过PCR延伸获得2条末端有部分重叠的双链核苷酸片段,再通过重叠PCR扩增,合成了用于泡盛曲霉表达的植物甜蛋白brazzein基因.结果:将brazzein基因克隆到pMD18-T载体,随机挑取6个重组质粒测序,结果1个重组质粒有连续4个碱基缺失,3个重组质粒各有1个碱基缺失,2个重组质粒携带的brazzein基因核苷酸序列完全正确.结论:合成的brazzein基因大小162bp,编码54个氨基酸,推断的氨基酸序列与Pentadiplandra brazzeana产生的天然brazzein 完全一致,表明植物甜蛋白brazzein基因成功合成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈波	西南科技大学生命科学与工程学院	87	625	14.0	21.0