Brazzein基因的合成及pGAPZαA-Bra表达载体的构建

• 作者: 刘松财 张丽萍 汤丹 王长远
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: Brazzein 克隆 pGAPZαA-Bra表达载体
• 年，卷（期）: 2008,（15）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 6230-6232
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 2888字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.15.036

摘要

[目的]为Brazzein基因在酵母SND1168中转化和表达奠定基础.[方法]利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)合成Brazzein基因,将其连接到pND18-T载体上,构建克隆载体pMD18-T-Bra.分别用Xho Ⅰ和Xba Ⅰ限制内切酶对克隆质粒pMD18.T.Brd和酵母表达载体pCAPZαA进行酶切,并在T4DNA连接酶作用下,将回收的目的基因连接到pGAPZαA载体上,构建重组质粒pGAPZαA-Bra.[结果]通过PCR扩增获得了约188 bp的Brazzein类似物的编码序列,将其克隆到pMD18-T质粒,用Xho Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切后,连接到pGAYZαA载体,成功构建了重组表达载体pGAPZαA-Bra.Brazzein基因其中各碱基未发生突变,整个表达载体阅读框正确无误.[结论]利用基因工程的方法生产Brazzein是可行的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张丽萍		244	1354	17.0	27.0
2	刘松财	吉林大学畜牧兽医学院	68	372	11.0	15.0
3	王长远		98	544	12.0	21.0
4	汤丹	吉林大学畜牧兽医学院	5	20	3.0	4.0