甜味蛋白Brazzein基因酵母表达系统的建立

• 作者: 刘松财 史勇 张明军 张英 李莉 汤丹
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 甜味蛋白 Brazzein基因 pGAPZαA-Bra 巴斯德毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 页码范围: 43-46
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3277字
• 语种: 中文

摘要

根据甜味蛋白Brazzein基因成熟区的氨基酸序列,结合毕赤酵母的密码子偏爱性以及Brazzein蛋白质结构的相关研究,对甜味蛋白Brazzein基因进行改造,使表达的目的蛋白中包含3个突变氨基酸(29Asp→Lys,31His→Ala,41Glu→Lys).采用重叠PCR(SOE-PCR)合成目的基因并克隆到pMD18-T载体,经测序鉴定,序列正确的质粒用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切.将回收得到的目的基因连接到经同样双酶切处理的pGAPZαA载体上,经PCR、酶切和测序鉴定,证明已成功构建pGAPZαA-Bra真核表达载体.将构建好的重组载体pGAPZαA-Bra用AvrⅡ线性化,电转进入巴斯德毕赤酵母中.筛选ZeocinTM阳性克隆菌,进行蛋白表达,SDS-PAGE结果表明蛋白表达成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘松财	吉林大学畜牧兽医学院	68	372	11.0	15.0
2	张明军	吉林大学畜牧兽医学院	23	73	4.0	7.0
3	史勇	吉林大学畜牧兽医学院	1	6	1.0	1.0
4	张英	吉林大学畜牧兽医学院	56	206	8.0	12.0
5	李莉	吉林大学畜牧兽医学院	82	319	9.0	13.0
6	汤丹	吉林大学畜牧兽医学院	5	20	3.0	4.0