WAVE1基因在K562/A02白血病细胞多药耐药中的作用

• 作者: 俞燕 康睿 曹励之 王卓 胡婷 许望琼 谢岷
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因,WAVE1 抗药性,多药 细胞系,K562/A02 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 379-382
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3664字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0253-2727.2007.06.006

摘要

目的 探讨WASP家族Verprolin同源蛋白1(WAVE1)基因在K562/A02白血病细胞多药耐药机制中的作用.方法 将pEFBOS-WAVE1真核表达质粒转染K562细胞构建WAVE1高表达的K562细胞,将WAVE1基因的特异性小片段干扰RNA(WAVE1 siRNA)转染K562/A02细胞构建WAVE1低表达的K562/A02细胞.Western blot和RT-PCR法检测基因转染前后K562/A02细胞及K562细胞WAVE1基因及蛋白的表达;可溶性噻唑盐WST-8染色法检测阿霉素对转染前后细胞的半数抑制浓度(IC50);Hoechest33258染色法检测细胞形态学改变并计算凋亡细胞百分率;RT-PCR检测多药耐药基因mdr1 mRNA表达;Western blot检测Bcl-2表达.结果 ①与K562细胞相比,K562/A02细胞WAVE1 mRNA表达水平增加70%,蛋白表达水平增加63%.②转染WAVE1基因的K562细胞WAVE1过表达,并降低了对阿霉素的药物敏感性,使IC50从转染前的(0.05±0.00)μg/ml,增加到(2.99±0.12)μg/ml,在阿霉素浓度为1、5 μg/ml时,凋亡细胞分别下降30%、35%.③转染WAVE1siRNA的K562/A02细胞WAVE1蛋白表达水平与未转染组相比明显降低,并可增强对阿霉素的药物敏感性,使IC50从转染前的(4.29±0.15)μg/ml下降到(1.85±0.07)μg/ml,阿霉素浓度为1、5 μg/ml时,凋亡细胞分别增加24%、21%.④转染WAVE1的K562细胞mdr1基因和Bcl-2蛋白表达水平均增高,而转染WAVE1 siRNA的K562/A02细胞mdr1基因和Bcl-2蛋白表达水平比转染前明显降低.结论 WAVE1参与了K562/A02细胞多药耐药的形成,其机制可能与调控mdr1和Bcl-2水平有关.