大肠杆菌glgC基因的定点突变及高效表达

• 作者: 刘恩平 姚庆荣 孔华 张金文 贺立卡 郭安平 郭运玲
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: glgC基因 定点突变 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术及组织培养
• 页码范围: 60-64
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2007.01.013

摘要

通过PCR方法,从E.coli JM109基因组DNA中扩增到全长为1 296 bp的glgC基因,对其进行定点突变,获得第296位和336位氨基酸同时突变的glgC336基因.将2者亚克隆进pET-30a,成功构建了重组表达载体pET-C和pET-C336,转化大肠杆菌BL21(DE3),在1 mmol/L IPTG诱导下进行表达.SDS-PAGE电泳分析显示,在约53 kD处有1条明显的蛋白表达带,证明目的基因已得到高效表达,且重组蛋白表达量占菌体蛋白总量的77.3%.