重组人可溶性DR5蛋白的分离纯化及其生物活性检测

• 作者: 刘广超 杜耀武 白慧玲 赵粤萍 马远方
• 来源期刊: 河南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人类重组蛋白 死亡受体5 细胞凋亡 Jurkat细胞
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 系列研究
• 页码范围: 25-27,31
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2447字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-7606.2007.01.006

摘要

目的:提纯毕赤酵母GS115菌株表达的重组人可溶性死亡受体5(sDR5)蛋白,并研究其对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)所诱导细胞的阻断效应.方法:大量扩增可溶性DR5酵母表达载体转化阳性的毕赤酵母GS115菌株,收集上清,利用Ni-NTA Agarose亲和层析柱纯化获得重组可溶性DR5,用SDS-PAGE检测纯化产物的纯度.用流式细胞仪检测纯化的可溶性DR5对TRAIL诱导Jurkat细胞凋亡作用的阻断效应.结果:转化阳性的毕赤酵母GS115菌株可以成功表达分子量为23kD的可溶性DR5蛋白,经过Ni-NTA Agarose亲和层析柱纯化,SDS-PAGE鉴定显示获得了高纯度的重组人可溶性DR5蛋白,培养上清产量达28.69mg/L;体外活性检测结果显示,纯化的可溶性DR5蛋白几乎完全可以阻断TRAIL诱导的Jurkat细胞凋亡作用.结论:经纯化后的重组人可溶性DR5蛋白可以有效阻断TRAIL诱导的细胞凋亡作用,显示DR5在TRAIL诱导Jurkat细胞凋亡作用中起着十分关键的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜耀武	河南大学细胞与分子免疫学重点实验室	47	149	7.0	9.0
2	白慧玲	河南大学细胞与分子免疫学重点实验室	76	307	10.0	13.0
6	赵粤萍	河南大学细胞与分子免疫学重点实验室	48	253	9.0	13.0
7	刘广超	河南大学细胞与分子免疫学重点实验室	45	208	9.0	11.0