颗粒溶素融合蛋白的克隆表达和免疫学鉴定

• 作者: 仲人前 吴传勇 周晔 蒋廷旺 邓安梅 钱(王争) 陈孙孝 陈燕
• 来源期刊: 上海医学
• 关键词: 颗粒溶素 重组融合蛋白 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 527-529
• 页数: 3页
• 分类号: R4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9934.2007.07.015

摘要

目的 采用基因工程方法重组并表达颗粒溶素融合蛋白.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)克隆颗粒溶素多肽分子的cDNA,经测序证实后定向插入表达载体pET28a(+),并经双酶切电泳鉴定.进而导入大肠杆菌BL21(DE3)plyS中,经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导后表达重组融合蛋白.结果 经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western印迹法鉴定,在相对分子质量为9 000处有明显的条带.结论 经重组表达获得颗粒溶素融合蛋白,有助于进一步探讨颗粒溶素与临床疾病的相关性.