pVT102U/α-bgln重组真核表达质粒的构建和鉴定

• 作者: 叶冰莹 林志楷 潘海芳 陈如凯 陈由强
• 来源期刊: 福建师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: β-葡萄糖苷酶 pVT102U/α 构建 真核表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 页码范围: 71-74
• 页数: 4页
• 分类号: Q784
• 字数: 2894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5277.2007.02.017

摘要

构建重组真核表达质粒pVT102U/α-bgln使之可以在酿酒酵母中表达以获得β-葡糖苷酶,用于提高从植物中提取白藜芦醇的得率.以含有从黑曲霉中获得的编码β-葡萄糖苷酶(bgln)成熟肽的cDNA的克隆质粒pMD19T-bgln为模板,用PCR的方法扩增β-葡糖苷酶基因片段(bgln),利用真核表达载体pVT102U/α构建pVT102U/α-bgln重组质粒,PCR结果显示扩增片段约2.6kb,与预期相同.用酶切电泳验证重组结果的正确性,重组质粒酶切后显示其大小约10kb,大小及酶切图谱与预期相同.测序检测质粒重组后序列情况,经测序发现插入片段两端序列无改变,且读码框正确.pVT102U/α-bgln质粒构建成功.